Пцр хламидии качественно или количественно. ПЦР-анализ: хламидии в зоне особого внимания

Возбудитель мочеполового хламидиоза – Chlamidia trachomatis - микроорганизм, способный размножаться только внутри клетки (чаще всего клетки эпителия мочеполовых органов). Хламидиоз часто характеризуется скрытым и бессимптомным течением, чем и обусловлена частота возникающих на его фоне осложнений.

Долгое время, до создания метода амплификации нуклеиновых кислот, диагностика хламидиоза была затруднена, так как при обычном микроскопическом исследовании возбудитель не виден. Была попытка внедрения цитологического метода с окраской мазка по Романовскому-Гимзе и выявлением специфических внутриклеточных включений.

Но такой метод требовал значительных затрат экономических ресурсов, времени, наличия опытного квалифицированного лаборанта. И это все при низкой информативности данного метода - порядка 10%.

Показать всё

1. Введение

Более подробно о хламидиях трахоматис (Chlamydia trachomatis) и путях заражения можно узнать в этой статье (). А здесь мы подробнее остановимся на методах диагностики мочеполового хламидиоза и расшифровке возможных результатов анализов.

Самой первой серологической пробой, внедренной для подтверждения диагноза "урогенитальный хламидиоз", была реакция связывания комплемента (сокращенно РСК). Проба быстро утратила свою актуальность из-за высокой частоты ложноположительных результатов.

На протяжении двух десятков лет одним из самых информативных способов диагностики урогенитального хламидиоза считался метод прямой иммунофлюоресценции с использованием моноклональных антител. На фоне вышеперечисленных методов он отличался несколько более высокими показателями специфичности и чувствительности. Вместе с тем, метод требовал обеспечения лаборатории дорогостоящим оборудованием и реагентами.

Еще один метод, актуальный и по сей день, – выявление хламидий в культуре клеток. Этот метод будет описан ниже.

Так или иначе, сейчас повсеместно распространен другой анализ на хламидии - исследование отделяемого или соскоба из уретры, влагалища или цервикального канала методом ПЦР.

1 ПЦР-диагностика. Федеральными и Европейскими клиническими протоколами для диагностики урогенитального хламидиоза рекомендован метод амплификации ДНК. В отношении первичного выявления инфекции его специфичность равна 100%, чувствительность 98-100% (уровень доказательности А, уровень обоснованности I).
2 NASBA (метод амплификации РНК).
3 Выделение хламидий в культуре клеток.
4 Цитологический метод. Этот метод исследования мазка малоинформативен при диагностике мочеполового хламидиоза (специфичность 10-12%): есть небольшая вероятность обнаружения внутриклеточных включений – так называемых телец Гальбершетдера-Провачека. Помимо этого, при микроскопии проводится подсчет числа лейкоцитов (увеличение их количества - доказательство воспалительного процесса), а также исследование флоры и обнаружение дрожжеподобных грибков.
5 Серологические тесты.
6 Последние три метода (3,4,5) могут применяться только в определенных ситуациях, когда недоступны методы амплификации ДНК и РНК (ПЦР и NASBA).

Анализы на хламидии назначаются:

1 Скрининг половых инфекций при беременности и предгравидарная подготовка.
2 Желательно ежегодно сдавать анализы женщинам и мужчинам в возрасте до 25 -30 лет, а также лицам, не имеющим постоянных партнеров на протяжении последнего года или недавно сменившим партнера.
3 Лицам, имеющим симптомы уретрита, вагинита, цервицита.
4 Женщинам с ВЗОМТ (сальпингоофорит, эндометрит и так далее).
5 При обнаружении у пациента любой другой половой инфекции.
6 Мужчинам молодого возраста с воспалением придатков яичка и орхитом.
7 При подготовке к внутриматочному вмешательству.
8 При пневмонии и гнойном конъюнктивите у новорожденного.

2. ПЦР на Chlamydia trachomatis

Суть метода ПЦР - обнаружение генетического материала (ДНК) в исследуемом образце и его достраивание путем добавления «строительного» материала (дезоксинуклеорибофосфатов). В результате цепь ДНК удлиняется, ее обнаружение становится возможным с помощью электрофореза и/или флюоресценции.

Все манипуляции выполняются в специальном приборе – амплификаторе, который самостоятельно контролирует смену температур и протекающих фаз соответственно числу необходимых циклов амплификации.

ПЦР позволяет обнаружить хламидии уже через 3 дня после заражения, при высоком риске исследование повторяют через 2 недели после предполагаемого инфицирования.

В настоящее время набирает большую популярность . С его помощью исследуется и качественная, и количественная характеристика влагалищной микрофлоры.

ПЦР в режиме реального времени характеризуется короткими сроками выполнения, высокой специфичностью и чувствительностью (порядка 88-90%).

Но для подтверждения урогенитального хламидиоза ряд авторов рекомендуют использовать монокомпонентные наборы для ПЦР из-за более высокой их чувствительности (100%) в отношении хламидий трахоматис.

Совет этот актуален в ситуации, когда врач подозревает наличие хламидийной инфекции у пациентки, и исследование проводится для верификации диагноза. При отсутствии специфических симптомов у женщины более целесообразно проведение комплексной ПЦР (уровень обоснованности II).

3. Амплификация РНК хламидий (NASBA)

Это относительно новый для России, но более информативный молекулярно-биологический метод. Суть его заключается в обнаружении в материале (мазке, соскобе, моче и так далее) цепей РНК, наличие которых сопровождает процесс построения и жизнедеятельности клетки хламидии.

РНК является транспортировщиком генетической информации от ДНК и строителем клеточных структур возбудителя путем синтеза белка.

Именно по наличию РНК в положительных результатах NASBA можно судить об эффективности проводимой антибактериальной терапии: оценивается жизнеспособность хламидий. ПЦР, основанная на обнаружении только ДНК, такой возможности не имеет.

NASBA может применяться для контроля излеченности в более ранние сроки по сравнению с ПЦР. Для контроля эффективности лечения данный метод актуален по прошествии всего 14 дней после последнего приема антибиотиков.

4. Как правильно сдавать анализ на хламидии женщинам?

Женщины анализ на хламидии методами ПЦР или NASBA могут сдать у врача-гинеколога, дерматовенеролога.

Материалами для исследования у женщин обычно служат:

Соскоб из уретры, влагалища, цервикального канала вне менструации. Условием является наличие в забранном материале клеток эпителия. При взятии обычного мазка, слизистого отделяемого, гноя и тому подобного, результат может быть не информативным.

Соскоб на анализ у женщин берут из наружного отверстия уретры, цервикального канала и заднего свода влагалища.

1 При использовании универсального зонда: после взятия материала рабочая часть зонда отламывается и погружается в пробирку «Эппендорф» с консервирующим раствором.
2 При использовании ложечки Фолькмана: ее ополаскивают в пробирке с консервирующим раствором. После этого емкость плотно закрывают, а инструмент дезинфицируют и стерилизуют.

Первая порция свободно выпущенной мочи. Именно в первой порции мочи сосредоточено максимальное количество слущенных эпителиальных клеток урогенитального тракта. У женщин первая порция свободно выпущенной мочи менее информативна (чувствительность 80-90%), поэтому применяется намного реже, чем соскоб. При этом нет доказательств, что утренняя моча более диагностически значима, чем, например, дневная (уровень обоснованности II).

Моча собирается пациенткой самостоятельно в чистый стерильный сухой контейнер. Для исследования достаточно порядка 10 мл мочи. Рекомендуемый период хранения - 24 часа при соблюдении необходимого уровня температур (+2С…+8С).

5. Особенности забора материала у мужчин

Мужчины сдать анализы на хламидии могут у врача-уролога, врача-дерматовенеролога, врача-репродуктолога, андролога.

Материалами для исследования у мужчин обычно служат:

Отделяемое из уретры, соскоб из уретры. Подготовка пациента: перед забором материала не мочиться 2-3 часа, при обильных выделениях - 15-30 минут. При наличии обильных патологических выделений (например, гноя) рекомендуется удалить их ватным тампоном.

Процедура взятия соскоба для мужчин достаточно неприятна, порой болезненна. Соскоб забирается универсальным зондом из наружного отверстия уретры. После забора рабочая часть зонда отламывается и погружается в пробирку «Эппендорф» с консервирующей жидкостью.

Первая порция свободно выпущенной мочи (чувствительность выше, чем у женщин - 85-95%).
По показаниям для анализа на хламидии у мужчин может забираться секрет предстательной железы (при бесплодии, простатите и др. заболеваниях). Подготовка включает половое воздержание в течение 2 дней. Секрет простаты берет квалифицированный специалист после массажа предстательной железы. Головку полового члена необходимо очистить стерильным ватным тампоном.

После завершения массажа выделившийся сок предстательной железы в количестве 0,5-1 мл собирают в сухую пробирку «Эппендорф» и плотно закрывают. При отсутствии секрета - собирают первую порцию мочи (в ней и будет содержаться весь секрет) по аналогии с обычной вышеописанной техникой.

Максимальный срок хранения всех вышеперечисленных материалов – 24 часа при строгом соблюдении температурного режима в диапазоне +2С…+8С.

Доставляется материал в специальном термоконтейнере с охлаждающими элементами. Для долгосрочного хранения взятый материал необходимо заморозить на срок не более 1 месяца при температуре -20С. Допускается только однократное размораживание материала.

6. Расшифровка результатов ПЦР и NASBA

1 Как правило, результаты ПЦР и NASBA доступны уже через 24-36 часов, в частных лабораториях сроки готовности результатов удлинены.
2 Результат может быть "положительный" (хламидии обнаружены, то есть у пациента хламидиоз) и "отрицательный" (хламидии не обнаружены, то есть у пациента мочеполового хламидиоза нет или получен ложноотрицательный результат).

При использовании методов амплификации нуклеиновых кислот (МАНК) для грамотной интерпретации результатов необходимо соблюдать некоторые условия:

1 Контрольное исследование для оценки эффективности терапии назначается не ранее, чем через 1-1,5 месяцев после окончания приема препаратов (для ПЦР), и не ранее, чем через 14 дней для NASBA. Метод ПЦР не подразумевает определение жизнеспособности обнаруженных микроорганизмов, поэтому необходимо выждать полный цикл смены эпителия.
2 При сборе первой порции мочи после последнего акта мочеиспускания необходим перерыв не менее 3 часов. При обильных патологических выделениях из уретры мочу собирают через 15-20 минут после последнего акта мочеиспускания.
3 Существует мнение, что изменения гормонального фона приводят к появлению в исследуемом материале ингибиторов амплификации (слизь, кровь, гной и другие компоненты). Данная ситуация наиболее актуальна в период беременности, у женщин.

Предлагалось множество способов устранения данной проблемы, но пока ни один из них не является общепризнанным:

1 Ситуация с ингибиторами амплификации актуальна для небеременных женщин на 3 неделе после менструации.
2 При заборе материала в первые дни после менструации есть вероятность ложноотрицательного результата за счет недостаточного накопления возбудителя в эпителии. Таким образом, оптимальный период для взятия соскоба – 4 неделя после менструации.
3 Нет никакой необходимости в специальной подготовке пациентки (например, введения каких-либо препаратов, соблюдения определенной диеты) перед исследованием. На результат это не повлияет.
4 Существует проблема так называемого конкурентного ингибирования. Подобная ситуация возникает при использовании лабораторией наборов для ПЦР-диагностики нескольких видов микроорганизмов. При значительном преобладании в образце какого-либо одного вида возбудителя последний может "замаскировать" наличие других видов микроорганизмов. Результат будет ложноотрицательный.
5 При подозрении на ложноположительный результат возникает необходимость повторного исследования. Эта ситуация актуальна при бессимптомном течении инфекции с низкой бактериальной нагрузкой. В этом случае возможно исследование того же образца, либо забор нового, а также применение другого теста или даже метода исследования (класс рекомендаций В, уровень обоснованности II). При выявлении большого количества хламидий в исходном материале повторное исследование будет лишним и экономически необоснованным.

7. Иммуноферментный анализ

Согласно последним Федеральным рекомендациям, иммуноферментный анализ (ИФА) не применяется для диагностики неосложненного урогенитального хламидиоза (цервицитов, уретритов и др.). Такое «недоверие» обусловлено тем, что ИФА больше актуален для тяжелых, глубоких поражений хламидиями C. Trachomatis.

Метод ИФА основан на обнаружении в крови специфических антител, вырабатываемых в ответ на антигены хламидий. По сочетанию трех классов иммуноглобулинов в крови пациента можно судить о тяжести и длительности инфекционного процесса.

Как уже было сказано, данный метод при выявлении урогенитального хламидиоза имеет ряд недостатков:

1 Не информативен в диагностике восходящей инфекции, цервицита и уретрита.
2 Высокая частота перекрестных реакций.
3 Высока частота ложноположительных реакций.
4 Не подходит для контроля излеченности после проведенной антибактериальной терапии, так как неизвестно время существования в крови специфических антител;
5 Позволяет диагностировать преимущественно глубокие поражения, например, врожденный хламидиоз у новорожденных (класс рекомендаций А, уровень обоснованности I).

Для проведения ИФА используется венозная кровь пациента, взятая натощак. В защиту данного метода можно отметить:

1 Его более низкую стоимость, по сравнению с ПЦР.
2 Удовлетворительная специфичность порядка 90%.
3 Быстрота выполнения.
4 Простота забора и хранения материала.

8. Выявление хламидий в культуре клеток (на среде McCoy)

Этот метод уникален тем, что позволяет оценить не только качество проведенной терапии, но и определить чувствительность хламидий к различным группам антибактериальных препаратов.

Суть метода состоит в заражении обработанной культуры клеток забранным материалом с последующим посевом на питательную среду и инкубированием в течение двух суток. Наличие хламидий в полученных клетках определяется методом ПЦР.

Для определения чувствительности к антибиотикам в обработанную культуру клеток вносят ростовую среду с содержанием определенного антибактериального средства и инкубируют в течение 5 суток.

Эффективность препарата определяют по отсутствию или замедлению роста в определенных группах. Наличие роста свидетельствует о резистентности к добавленному в питательную среду антибиотику.

Недостатки этого метода диагностики - длительность (7 дней) и дороговизна, поэтому в клинической практике он используется в крайне редко. Обычно показанием для его назначения служит длительная неэффективная антибактериальная терапия.

9. Экспресс-методы

За рубежом в качестве рутинных, недорогих методов выявления хламидийной инфекции используются модифицированные серологические тесты.

9.1. Тест-система Chlamidia-antigen ELISA medac

Тест-система работает по принципу твердофазного ИФА-анализа. Готовая тест-система покрыта полученными путем генной инженерии, готовыми специфическими антителами. Данные антитела связаны со специальным ферментным комплексом.

При связывании антигенов с антителами ферменты высвобождаются, появляется желто-зеленое свечение, интенсивность которого и учитывает спектрофотометр.

В отличие от распространенного ИФА, где материалом для исследования служит кровь, при использовании данной тест-системы субстратом служат мазок или соскоб, взятые у женщины, мужчины. Чувствительность этого метода - около 65-70%, а специфичность 90-100%.

9.2. РИФ

В основе реакции иммунофлюоресценции (РИФ) лежит прямое связывание антигенов с мечеными антителами, дающими зеленое свечение. Хламидийные тельца подсвечиваются внутри клетки. Результат оценивается при люминисцентной микроскопии.

Чувствительность данного метода - около 50%, что связано с высокой частотой ложных результатов. Это обусловлено и субъективным восприятием результата (исследование проводит лаборант), и высокой вероятностью перекрестных реакций, и нарушением техники забора биологического материала. С помощью данного метода невозможно оценить эффективность проведенного лечения.

На фоне всех недостатков главными плюсами РИФ остаются низкая стоимость, простота выполнения и короткие сроки получения результата. Именно поэтому РИФ еще используют в некоторых странах в качестве рутинного исследования на мочеполовой хламидиоз.

ПЦР на хламидии назначается врачами в том случае, когда у человека подозревают заражение хламидиозом. Подобная проблема часто остается незамеченной, а если имеются какие-то симптомы, то они воспринимаются, как иные женские недуги. Именно по этой причине ПЦР считается самым действенным методом определения хламидиоза в лабораторных условиях.

Общая информация

Венерическая болезнь может стать результатом проблем с органами малого таза, уретрита, простатита или орхита, спаек в маточных трубах и даже невозможности забеременеть.

Мазок – это анализ, в процессе которого исследуются биологические материалы, взятые из уретры или мужской простаты, влагалища или шейки матки. Такой анализ применяется в медицине уже довольно давно. Он выполняется очень легко, не требует наличия специалистов или какого-то современного оборудования и совершенно безболезненный.

Стоит отметить тот факт, что ПЦР не дает 100% надежности, ибо мазок находит заболевание только в том случае, если на половых органах уже есть воспаление.

Кроме того, исследование на хламидии говорит лишь о том, что в организме протекает лейкоцитоз. Это может свидетельствовать о наличии любых бактерий, но не достоверно это подтверждать. Ведь воспаление развивается по многим причинам, например, из-за инфекционного или вирусного процесса, а не только при хламидиозе. К тому же, во время протекания такого недуга, лейкоциты не обязательно повышаются.

Сегодня в любом аптечном пункте можно приобрести экспресс-тест ПЦР мочи, в комплекте с которыми идет подробная инструкция по его использованию. Воспользоваться тестом может каждый желающий, ибо делается он в домашних условиях. Но если говорить о надежности результата, то он не всегда полностью достоверен. Именно поэтому будет уместнее провериться в клинике, под присмотром специалиста.

Когда проводится?

В ситуации, когда человек знает, что у него был секс с больным партнером, он может самостоятельно прийти к врачу и сдать анализ. Если же он не подозревает про заболевание, то исследование проводят в плановом порядке в таких ситуациях:

Пациент ведет беспорядочную половую жизнь.
У половых партнеров обнаружен хламидиоз.
Болезнь дает о себе знать – появились ее симптомы.
Становление на учет при беременности.
У человека имеется хроническая форма болезни.

Как проводится анализ?

Для того чтобы обследовать пациента методом ПЦР, лаборант должен взять у него кровь, мочу или мокроту. Чтобы исследовать половые инфекции хламидии, анализ выполняется соскабливанием с уретры. Мазок также может проводится в цервикальном канале. Обследование должно осуществляться не раньше чем через сутки после последнего полового контакта. Чаще всего, ПЦР назначают для подтверждения или опровержения диагноза после проведения основных анализов.

Такое исследование позволяет выявить в организме человека возбудителя хламидиоза, ВИЧ, гепатита, туберкулеза, герпеса или кишечных инфекций. Готовиться к нему как-то конкретно не следует – процедура идентична взятию крови из вены. Поэтому переживать о том, как сдавать анализ, не стоит.

Расшифровка анализа может быть положительной или отрицательной. Отрицательный итог указывает на то, что во взятом материале антитела к возбудителю отсутствуют. Это значит, что заражения у человека нет, но стоит не забывать о том, что антитела вырабатываются на протяжении суток после инфицирования, поэтому анализ может быть сомнительным. Положительный же результат говорит о том, что инфекция в организме имеется.

Методика ПЦР дает возможность более качественно и надежно выявить болезнь. Позволяет предотвратить появление ложноположительного ответа.

В период беременности

Беременность – это такой период, когда женщина волнуется по любому поводу, ибо от ее здоровья зависит состояние будущего младенца. Если у будущей мамы есть общая слабость организма, повышается температура тела и болит низ живота, то врач должен направить ее на прохождение анализа.

У дам в интересном положении есть возможность выявить хламидиоз на ранних сроках инфицирования, что дает возможность провести эффективную его терапию. Лечение осуществляется медикаментами, действенными для мамы и безопасными для ребенка. Вред от антибиотиков для плода намного ниже, чем риск инфицирования хламидиозом от матери.

Как сдать анализ?

Мужчины страдают от первично-хронического течения болезни чаще, чем женщины. Для подтверждения диагноза мужчина должен сдать соскоб из уретры в специально отведенном для этого кабинете. Если результат оказался сомнительным, то доктор назначает дополнительное обследование спермы на хламидиоз.

Женщинам приходится делать мазок с влагалища или маточной шейки. Это происходит во время визита к венерологу. Стоит учесть, что анализ берут в период отсутствия месячных, вне приема антибиотиков и спринцевания антисептиками. Если есть необходимость, то проводится дообследование мочи на выявление инфекции.

Сдача анализа в острой форме болезни.
За 21 день до анализа нельзя заниматься сексом.
Не принимать антибиотики.

Тогда, когда ПЦР пришел отрицательным, а все остальные исследования показали обратное, следует сдать анализ еще раз. На метод негативно влияют следующие факторы:

Состояние иммунитета пациента.
Количество времени, прошедшее от момента заражения.
Правильная подготовка к анализу.
Уровень мастерства лаборанта.
Употребление спиртных напитков и жирной пищи.
Прием некоторых медикаментов.
Ультрафиолетовое излучение, УЗИ и МРТ.
Прием пищи непосредственно перед исследованием.

Если анализ оказался положительным и все остальные варианты тоже подтверждают диагноз, то обследование должны сдать повторно уже оба партнера.

Достоинства и недостатки

К положительным моментам можно отнести тот факт, что анализ позволяет выявить не только хламидии, но и некоторые другие венерические инфекции.

Кроме того, для исследования не нужна дорогая техника и большое количество изучаемого материала.

К минусам относят появление ложноположительных или ложноотрицательных результатов и высокая стоимость проведения процедуры.

Хламидиоз, чаще всего, выявляется случайно. Болезнь протекает бессимптомно, поэтому на ранних сроках ее обнаружить сложно. Если человек хочет избежать возможных осложнений, то он должен следить за здоровьем и регулярно сдавать анализы на инфекции, передающиеся половым путем даже тогда, когда его не беспокоят никакие симптомы заболевания.

Высокочувствительный способ определения организме возбудителя хламидиоза – ПЦР на хламидии. Как сдавать этот анализ и зачем? Среди венерических заболеваний, характерных для мужчин и женщин, именно это заражение наиболее распространенное. Своевременная сдача анализа позволяет выявить инфицирование и предотвратить осложнения.

О чем идет речь

ПЦР (полимеразная цепная реакция) изобретена в 1970-х годах. Усовершенствование технологий повысило точность результата. Метод высокочувствителен, поэтому покажет ДНК возбудителя даже при малых объемах пробы. По этой причине ПЦР на хламидии предпочтительнее, нежели антитела. При проведении исследования на хламидии искусственно создают условия, в которых инфекция размножается, вырастая до объемов, допускающих визуальное определение. Методика не теряет эффективности даже в случае, когда возбудитель растет медленно.

Провоцирующие хламидиоз Chlamydia trachomatis распространены, но течение заболевания долгое время не влияет на качество жизни, и изменения не замечают. Те немногие признаки, которые проявляются при вялотекущих процессах, больные игнорируют или путают с другими нарушениями. ПЦР на хламидии точно устанавливает, произошло ли инфицирование и насколько велики масштабы поражения.

Материал для лаборанта – соскоб, взятый из мочеиспускательного канала, шейки матки. Гемотест, прочие варианты исследований точны в 20% случаев. Верный результат получают только при помощи ПЦР.

Хламидиоз: особенности

ПЦР как метод диагностики хламидийной инфекции распространен с 90-х годов. Специфика технологии в выявлении возбудителя, обитающего внутри другой клетки. А вот антитела, широко используемые при определении ряда заболеваний, не всегда способны определить наличие внутриклеточного заражения.

Без лечения хламидиоз провоцирует вторичные заболевания женской репродуктивной системы, неспособность выносить плод и зачать ребенка.

генитальных инфекций;
орнитоза;
болезней дыхательной системы.

Хламидиоз распространен у человека и животных. Например, у кошек страдают глаза, ЖКТ и легкие. Диагностируют той же полимеразной реакцией.

Среди людей наиболее распространена форма, провоцируемая генитальными патогенами. Хламидиоз провоцирует нарушения мочевыделительной системы, приводит к развитию воспалительных процессов в полости таза и формированию спаек.

Характерные осложнения у женщин:

эндоцервицит;
уретрит;
артрит;
саечный процесс в полости таза;
внематочная беременность;
частые выкидыши;
бесплодие.

У мужчин наблюдают:

цистит;
проктит;
простатит.

Диагностика

Мазок на хламидии методом ПЦР – точный способ определения, присутствует ли в организме возбудитель. Технология микроскопическая, предполагает получение биологического материала и дальнейшее размножение в лабораторных условиях.

Полимеразная цепная реакция проводится при получении:

мазка из уретры;
секрета простаты;
мазка с шейки матки;
тканей влагалища.

В домашних условиях полимеразная реакция проводится при помощи экспресс-теста. Приобретают такой в аптеке, биологический материал – моча. Достоверность этого варианта меньше, нежели лабораторного исследования на хламидии, но при положительном результате сомнений нет – пора идти ко врачу.

Перед анализом

Подготовка к сдаче биоматериала – залог точности результата. Помните, хоть способ и эффективен, несоблюдение рекомендаций приводит к некорректному результату.

Подготовительные меры:

за 1-3 дня до сдачи биоматериалов исключают половые контакты;
последнее мочеиспускание происходит за 3-4 часа до забора материала;
анализ на хламидии сдают через 3-4 дня после прекращения менструального кровотечения;
недопустимо спринцевание за 24 часа до посещения врача;
исключение лекарственных средств (прежде всего антибиотиков), кроме прописанных доктором, за 7 дней до сдачи биоматериала.

Особенности полимеразной цепной реакции

Анализ ПЦР на хламидии в лаборатории проводится на разных биоматериалах. Если прежде использовали ткани половых органов, мочеиспускательной системы, теперь врачи дают точный диагноз по слюне, семенной жидкости, моче. Забор производится универсальным зондом с использованием гинекологических зеркал.

Взяв анализ на хламидии методом ПЦР, рабочий инструмент располагают в защищенной емкости, наполняют транспортной жидкостью, герметично закрывают. Почему это необходимо? Реакция высокочувствительная, специфичная и точная, поэтому недопустимо проникновение чужеродных бактерий, инфекций и вирусов. При исследовании полученных материалов в лаборатории выделяют свойственную хламидиям часть ДНК. Результат подготавливается за 6-8 часов. Точность и скорость гарантированы автоматизацией лабораторного процесса.

Преимущества ПЦР на хламидии

Выбирают полимеразную реакцию благодаря:

быстроте получения результатов;
выявлению скрытых инфекций;
универсальности;
чувствительности;
возможности выявления ДНК возбудителя.

Беременность

Можно ли проходить ПЦР на хламидии при вынашивании плода? Как сдавать биоматериалы в «интересном положении»? Технология совпадает с применимой для небеременных женщин. Врачи рекомендуют пройти исследование на этапе планирования ребенка, но случаются ситуации, когда необходимость возникает уже после зачатия.

При беременности анализ на хламидии позволяет выяснить, велика ли опасность заражения матери и ребенка одновременно. Бытует мнение, будто бы забор биоматериала вредит плоду. Это стереотип, не имеющий никаких оснований. Мазок получают с шейки матки. При этом рабочий инструмент гинеколога (зонд, зеркало) не попадает в матку, не вредит околоплодному пузырю. Процесс безопасный, безболезненный.

Преимущества

В сравнении с методами, использующими антитела, ПЦР указывает на различные инфекции, включая скрытые, бессимптомные. Применение полимеразной реакции диагностирует:

гепатит В, С;
хламидиоз;
микоплазмоз (Mycoplasma genitalium);
туберкулез;
герпес;
хеликобактериоз;
мононуклеоз инфекционного происхождения;
трихомониаз.

Результаты

ПЦР на хламидии дает один из двух результатов:

Отрицательный, когда материал не содержит инфекционных следов.
Положительный. Возможен даже в случае, когда антитела при других исследованиях показали отсутствие возбудителя. Это объясняется чувствительностью технологии. Такой результат говорит о наличии инфекции в изученных клетках. Результат качественный, о количестве выводов делать нельзя.

При положительном результате врач определяет, как уточнить диагноз и какое лечение требуется.

Проведение ПЦР

Материал для лаборатории получают пластиковым зондом или гинекологической щеткой. Полученные вещества собирают в коническую герметичную полуторамиллилитровую пробирку, заполняют незанятое пространство розоватой средой.

Пробирки одноразовые, стерильные. Материалы для исследования на хламидии получают из уретры, шейки матки. Недопустимо, чтобы мазок содержал кровь, поэтому соскоб берут аккуратно.

Изучение биоматериала производится амплификацией. Процесс дает точный результат за 6-8 часов. При этом происходит копирование последовательности ДНК за счет ДНК-полимеразы. На каждом цикле внедряется праймер. Смену циклов обеспечивают температурным режимом.

Высокая чувствительность — преимущество ПЦР на хламидии в сравнении с ИФА и иммунофлюоресцентны исследованием.

Реакция происходит в три стадии:

повышение температуры до 94°С превращает молекулу ДНК в одноцепочную (денатурация);
связываются короткие синтетические фрагменты с заданными участками белковых цепей (отжиг);
синтезируются новые ДНК при нагреве до 70-72°С (полимеризация).

Точность гарантирована исключением перекрестных реакций.

Подводя итоги

Несмотря на распространенность и опасность хламидиоза, ПЦР выявляет заболевание в активной и латентной форме. Рекомендовано сделать исследование при первых симптомах заражения и после лечения заболевания.

Не стесняйтесь идти ко врачу, заподозрив половые инфекции! Для женщины, особенно для будущей матери, важно следить за здоровьем и своевременно обращаться в клинику. Помните, запущенный хламидиоз ведет к серьезным поражениям органов и бесплодию. Сдав анализ методом ПЦР, женщина не только выясняет присутствие хламидий в организме, но и получает точные данные о других возбудителях, в том числе скрытых.

Содержание

Серьезная инфекция, чаще передающаяся половым путем, опасна тяжелыми последствиями. Лабораторные методы диагностики – анализы крови на хламидии – помогают выявить заболевание, приступить к его лечению. Какие особенности имеют обследования, насколько информативны все их разновидности, как происходит расшифровка результатов – вопросы, на которые интересно получить ответы.

Chlamydia trachomatis – что это

при незащищенном половом акте;
бытовым путем;
при беременности от инфицированной матери ребенку;

для мужчин болезнь опасна развитием простатита, импотенции, хламидийной пневмонии;
у женщин хламидии провоцируют выкидыши, спайки в малом тазу, преждевременные роды, опухоли матки.

Диагностика хламидиоза

Заболевание длительный период после заражения может быть бессимптомным. Часто хламидиоз выявляется при диагностике других половых инфекций. Из-за особенностей биологического цикла возбудителя анализы проводят несколькими способами. Лабораторная диагностика хламидиоза включает методы исследования:

первичный микроскопический анализ мазка;
культуральный способ – посев биоматериала в специальную среду – дает точный результат;
РИФ хламидиоза – определение реакции иммунофлюоресценции – возбудители светятся под микроскопом, отличается достоверностью.

Анализ на хламидии

Самую точную диагностику по выявлению хламидийной инфекции имеют анализы крови. Производят их по нескольким методикам, имеющим свои особенности. Основные виды обследования:

Иммуноферментный анализ – ИФА. По количеству антител Igg, Igm, Iga определяется, какая фаза в данный момент наблюдается у заболевания – острая, хроническая или ремиссия.
Полимерно цепная реакция – ПЦР. Обнаруживает ДНК возбудителя, является очень надежным методом диагностики.

осуществившим незащищенный секс с новым половым партнером;
женщинам, имеющим частые недомогания вследствие заболеваний малого таза;
обоим партнерам при планировании беременности, чтобы не заразить ожидаемого малыша;
женщинам, имеющим проблемы вынашивания ребенка;
пациентам с невыясненными причинами бесплодия.

Кровь на хламидии забирается из вены. Для получения объективных результатов врачи рекомендуют соблюсти требования:

делать анализы не ранее месяца после лечения антибиотиками;
не иметь половых контактов в ближайшие суток до момента обследования;
не курить за полчаса до забора крови;
приходить на исследование на голодный желудок;
за день не употреблять алкоголь;
не пить воду перед проведением анализов;
исключить выполнение физиопроцедур.

ПЦР на хламидии

При этом методе исследования хламидиоз в крови определяется по количеству ДНК микроорганизмов, которые находятся в отобранном образце. Анализ полимерной цепной реакции – ПЦР – отличается очень высокой точностью и чувствительностью. Результат получается быстрый и достоверный. Его считают положительным при большом количестве хламидий в пробе для исследования – подтверждается причина инфицирования. Преимущество метода – при его помощи выявляются инфекции:

в скрытой форме;
малосимптомные;
при острой стадии.

Большую опасность хламидиоз представляет для женщины, ожидающей рождения малыша. Велика вероятность внутриутробного заражения. Вовремя проведенная диагностика поможет начать лечение на ранней стадии, избежать серьезных проблем. Анализ ПЦР хламидии назначают гинекологи для исключения инфицирования, когда у беременной наблюдаются симптомы:

повышенная температура;
болезненность внизу живота;
плохое самочувствие.

Анализа крови ПЦР является универсальным. С его помощью определяется не только возбудитель хламидиоза, но и других инфекций – герпеса, туберкулеза, гепатита. При расшифровке возможны два варианта результатов:

отрицательный – свидетельствует об отсутствии заражения организма;
положительный – показывает, что инфицирование произошло, и каким видом бактерий.

ИФА на хламидии

С первых дней инфицирования организм начинает продуцировать антитела к хламидиям в крови. На защиту от болезни встают три вида иммуноглобулинов, которые называются Igg, Igm, Iga. Иммуноферментный анализ – ИФА на хламидиоз не только точно определяет их наличие, но констатирует стадию, в которой находится заболевание. Это связано с появлением каждого из антител на конкретном этапе инфицирования.

При исследовании крови методом ИФА иммуноглобулины выявляются в такие сроки:

после заражения сразу появляется Igm, если два других отсутствуют – диагностируют острое воспаление, важен при обследовании новорожденных;
через месяц после инфицирования образуются антитела Iga, которые говорят о прогрессировании болезни;
появление Igg сигнализирует о переходе хламидийной инфекции в ее хроническую форму.

Расшифровка анализа на хламидии

Интерпретация результатов обследования имеет тонкости, поэтому должна проводиться квалифицированными специалистами. Анализ крови на хламидии ИФА расшифровывается по каждому виду иммуноглобулинов, говорит о периоде развития инфекции. При определении Igm результаты таковы:

Положительный: со времени заражения прошло менее, чем две недели; если не обнаружены другие антитела, при наличии Igg, – обострение хронического воспаления.
Отрицательный: хламидиоза нет – при отсутствии всех иммуноглобулинов; когда определяется Igg – заражение произошло не менее двух месяцев назад.

При анализах крови на наличие антител Iga результат трактуется так:

Положительный: острая стадия хронический инфекции или при заражении, с момента которого прошло более двух недель; инфицирование ребенка при беременности.
Отрицательный: хламидийное воспаление отсутствует; со времени заболевания менее 14 дней; невелика вероятность заражения плода.

При расшифровке теста на Igg выдаются такие результаты:

При норме – отсутствуют, значение коэффициента позитивности в границах 0–0,99;
Положительный: заболевание хламидиозом или его обострение произошло более трех недель назад.
Отрицательный – в случае одновременного отсутствия иммуноглобулинов Iga Igm: хламидий в крови нет; полное выздоровление.

Где сдать анализы на хламидиоз

Тем, кто почувствовал признаки заболевания, имел незащищенный секс со случайным партнером, можно приобрести в аптеке экспресс-тест. С его помощью быстро определяется наличие заражения хламидиозом. Для анализа нужна моча или мазок у женщин. В инструкции описан метод их забора. Результат расшифровывается так:

положительный – требует немедленного обращения к венерологу для назначения лечения лекарствами;
отрицательная проба свидетельствует, что заболевание в момент проведения теста отсутствует.

Сдать анализы на хламидиоз можно по направлению врача- венеролога или гинеколога. Не исключено самостоятельно обращение пациента в медицинские учреждения при подозрении на инфицирование. Анализ крови на хламидиоз проводят такие организации:

женские консультации;
клиники планирования семьи;
кожно-венерологические диспансеры;
специализированные лаборатории для проведения исследований.

Сколько стоит анализ на хламидиоз

Сделать анализы на хламидии можно в клиниках или специализированных центрах, оказывающих такие услуги. Стоимость находится в зависимости от статуса учреждения, имеющегося оборудования. Играет роль классификация специалистов, занимающихся расшифровкой результатов. Цена анализа на хламидии в медицинских организациях Москвы сведена в таблицу:

Видео: как сдавать анализ крови на хламидии

Внимание! Информация, представленная в статье, носит ознакомительный характер. Материалы статьи не призывают к самостоятельному лечению. Только квалифицированный врач может поставить диагноз и дать рекомендации по лечению, исходя из индивидуальных особенностей конкретного пациента.

Нашли в тексте ошибку? Выделите её, нажмите Ctrl + Enter и мы всё исправим!

Заражение происходит при половом акте, контактно-бытовым способом. Хламидиоз – это инфекция, вызываемая бактериями вида Chlamydia trachomatis.

В 90% случаев заболевание поражает мочеполовую систему. Какие анализы сдают на хламидиоз у женщин и какова их достоверность? Давайте разберемся вместе.

Какие виды исследований биоматериала на хламидиоз бывают?

Когда бактерии активно размножаются, местный иммунитет женщины ослабевает. Снижение защитных реакций приводит к сопутствующим заболеваниям и осложнениям.

Способы диагностики хламидиоза у женщин:

экспресс-тест;
мазок на флору;
полимерная цепная реакция;
иммунохроматографический анализ;
иммуноферментный (иммуноморфологический);
цитоскопический (РИФ, ПИФ метод);
культуральный метод (бактериологический посев).

Каждый способ диагностики имеет свои особенности в сборе материала и подготовке к исследованию.

Смотрите видео о методах диагностики хламидиоза:

Иммунохроматографический анализ (ИХА)

Для выявления инфекции проводят экспресс-тест. Он продается в аптеке. Производитель указывает, что достоверность метода 75%. Однако, практика показывает только 20-50% совпадений с медицинской диагностикой. Если результат окажется положительным, тест не освобождает от дополнительных анализов в клинике. По итогам ИХА врач не сможет назначить лечение.

Как определить хламидиоз у женщины иммунохроматографическим способом? Для анализа используют мочу или слизь из влагалища. На индикатор теста наносят приготовленный биоматериал. Перед сбором пробы производители рекомендуют:

в течение 2 часов не опорожнять мочевой пузырь;
накануне теста нельзя проводить спринцевание;
не использовать вагинальные свечи и крема за несколько дней до проведения теста.

В противном случае достоверность результата останется под вопросом. Все что нужно для проведения теста есть в наборе вместе с подробной инструкцией по применению.

Противопоказаний к проведению экспресс-теста нет.

Такой метод используют после полового акта со случайным партнером или при подозрительных выделениях из половых путей.

Метод основан на принципе иммунной хроматографии.

Преимущества ИХА:

возможность провести тест в домашних условиях;
быстрый результат;
не требуется специального оборудования для выявления инфекции;

Большинство врачей считают такой метод пустой тратой денег, т.к. лечение назначается по результатам лабораторных исследований.

Как берут мазок на флору?

При гинекологическом осмотре у женщины берут 3 мазка на флору:

из мочеиспускательного канала;
влагалища;
шейки матки.

Как берется анализ на хламидии у женщин таким способом? Частицы выделений собирают специальной щеточкой. Процедура неприятная, но безболезненная. Для выявления хламидиоза проводят бактериологический посев материала. Обычное исследование под микроскопом не определит возбудителя инфекции.

Исследование безошибочно определяет наличие воспалительного процесса в половых органах. Вероятность выявить хламидии таким методом составляет всего 15%. Мазок берут наряду с другими способами диагностики.

Если женщина принимала антибиотики, и с приема последней таблетки не прошел месяц, анализ не проводят. Препараты убивают часть бактерий. Остальные хламидии временно бездействуют. Заболевание протекает в скрытой форме.

Плюсы метода:

анализ проводят бесплатно в государственной поликлинике;
позволяет выявить сопутствующие патологии.

Вашему вниманию предлагаем видео о том, как берут мазок на флору на хламидии:

Полимерная цепная реакция (ПЦР)

Самый достоверный из методов. Точность исследования достигает 100%. Ложный результат бывает только при неправильном сборе и обработке материала. Этому способу отдают предпочтение большинство специалистов. Если результат положительный, сомнений по поводу хламидиоза быть не должно.

Материал для анализа:

соскоб верхних клеток слизистых оболочек;
моча, при симптомах поражения инфекцией мочеиспускательного канала;
кровь – в ней могут присутствовать антитела к хламидиям.

Если врач дал направление на анализ мочи, сдают первую утреннюю порцию. Объем материала 20-30 мл.

Исследование методом ПЦР проводят 1-2 дня. Данный способ является предпочтительным при диагностике заболевания.

Видео об анализе ПЦР:

Как выявить иммуноферментным способом (ИФА)?

позволяет обнаружить микроорганизмы в крови на 10-20 день заражения;
определяет форму заболевания – острую или хроническую;
указывает на активацию плохо пролеченного хламидиоза;
выявляет антитела к другим видам хламидий, не только к генитальным.

ИФА дополняет ПЦР. Эти два анализа проводят вместе. ИФА сдают также для проверки проведенного лечения. По результатам теста не всегда понятно, болеет ли человек на данный момент или инфекция была перенесена ранее.

Как нужно подготовиться к сдаче анализа на антитела:

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

В некоторых клиниках такой анализ называется цитоскопическим ПИФ методом.

Исследование материала проводят под флюоресцентным микроскопом. Если в клетках есть хламидии, наблюдается свечение. Микроорганизмы напоминают по форме звездочки. Вероятность ошибки составляет 50% .

Метод редко используют, т.к. легко спутать хламидии с другими группами бактерий. Чаще всего их путают со стафилококками. Играет роль и человеческий фактор. Если анализ проводит опытный врач, достоверность результата значительно увеличивается.

Как диагностировать с помощью бактериального посева?

А как сдается анализ на хламидии у женщин с помощью бактериального посева? Для исследования у женщины берут мазок. Собранный материал помещают в питательную среду. Результат оценивают через 6-8 дней. Если в мазке есть хламидии, за этот период времени они размножатся и будут видны лаборанту. Достоверность результата – 100%.

После выявления бактерий, проводят исследование их свойств и период жизнедеятельности в организме больного.

Посев проводят редко по причине трудоемкости и высокой стоимости. Бактериальный посев рекомендуют:

при возникновении медико-правовых конфликтов;
для диагностики хламидиоза у девственниц;
при подозрении на инфекцию во рту или в прямой кишке.

Как подготовиться к сдаче?

Для достоверности результата женщина должна соблюдать правила подготовки:

Правила подготовки распространяются на все методы диагностики . Если женщина недавно лечилась антибиотиками или местными антибактериальными средствами, анализ проводят позже.

На беременных женщин распространяются все правила кроме рекомендаций по дням менструального цикла.

Попытки самолечения приводят к переходу болезни в хроническую стадию. Лечение комплексное, основанное на приеме нескольких действующих средств, которые требуют правильного сочетания. Иначе терапия не даст результата или приведет к осложнениям.

Боле подробно о том, как правильно подготовиться к анализу, вам расскажет врач:

Расшифровка

В норме хламидий в мазке у женщины не должно быть. В таблице ниже приведены возможные результаты анализов и их расшифровка:

Название	Расшифровка результата	Через сколько дней готов анализ	Цена в рублях
ПЦР	– хламидий нет, Хламидии обнаружены	1-2	250-300
ИФА	– антитела не обнаружены +/– сомнительно, есть небольшое количество антител Антитела обнаружены	2-3	450-500
ПИФ	– антигены бактерий не обнаружены (отрицательный результат) Антигены обнаружены (хламидии есть)	2-3	350-400
Посев	– рост не наблюдается, хламидий нет, Рост есть, хламидии найдены	6-8	1000
Экспресс-тест	2 полоски – хламидиоз есть, 1 полоска – хламидиоза нет	10 минут	300
Цитологический метод	– хламидии в клетках не обнаружены, Хламидии обнаружены	2-3	450

Какой способ диагностики выбрать?

Как сдавать анализ на хламидии у женщин и какой способ диагностики выбрать? Это решает ваш лечащий врач.

Но самые точные исследования:

бактериальный посев.

Эти же методы подойдут, чтобы оценить эффективность лечения. Важный нюанс – ПЦР нет смысла сдавать, если не прошел месяц с приема последней таблетки антибиотиков . После проведения первоочередных исследований врач сопоставит результаты. Если есть необходимость, назначит дополнительные способы диагностики.

Когда основные анализы показывают наличие хламидий в клетках, другие виды исследований не назначают. Но если данные противоречат друг другу целесообразно пройти дополнительные анализы.

Одной схемы диагностики хламидиоза специалисты не придерживаются. Сдают анализ обычно 3-5 способами. Такое разнообразие позволяет назначить правильное лечение, исключить ложные выводы.